viernes, 10 de octubre de 2008

Trichinella spiralis

Trichinella spiralis
Patogénesis de las infecciones animales
Aspectos preventivos de la zoonosis

Mabel Ribicich Med Vet MS
Parasitologia y Enfermedades Parasitarias

Trichinella spiralis es uno de los parásitos intracelulares más grandes y a diferencia de otros organismos con similares características biológicas, éste no mata la célula huésped, pero induce profundas modificaciones en la estructura celular que favorecen su propia supervivencia.
El parásito tiene un ciclo de vida directo, el cual completa una generación dentro del organismo de un solo huésped. Este se inicia tras la ingestión de carne cruda o insuficientemente cocida por parte de un hospedador susceptible. El hombre y los animales domésticos como el cerdo, roedores, perro, gato y caballo, son los comúnmente involucrados en el ciclo domestico, mientras que los animales silvestres completan la amplia gama de hospedadores de sangre caliente en el ciclo selvático.

La fase entérica
En las fibras musculares se aloja la larva infectante (L1) que ingresa por vía oral, y al llegar al estómago, en pocos minutos queda en libertad por la acción de la pepsina y el ácido clorhídrico. Una vez que el proceso de digestión ha permitido su libertad, la L1 penetra rápidamente a su nicho intracelular en el intestino delgado, aproximadamente a los 10 minutos de haber finalizado la digestión. (Despommier, 1978, 1998). El tracto gastrointestinal del hospedador es uno de los target u órgano blanco de T. spiralis. El intestino delgado, es el sitio primario de establecimiento, desarrollo y maduración de los adultos de T.spiralis, siendo la gastroenteritis y diarrea, los síntomas más comunes de esta fase. Estos síntomas característicos de la infección humana generalmente pasaran desapercibidos en los animales.
La gravedad de la afección depende fundamentalmente del número de larvas ingeridas por el hospedador, tal es así que en ingestiones leves los daños son úlceras diminutas y pequeñas hemorragias, mientras que en casos severos hay edema, marcada infiltración celular y hemorragia profusa. También es factible observar hiperemia, petequias en la serosa, inflamación y atrofia de las vellosidades, gran cantidad de mucus, agrandamiento de las placas de Peyer y dilatación de las asas intestinales. En el intestino grueso se han encontrado larvas en ciego y colon en diferentes especies pero es importante aclarar que a estas localizaciones se las considera “anormales”.
La injuria de la mucosa intestinal desarrollada por la infección por T.spiralis es acompañada por un aumento en la expresión de citoquinas pro-inflamatorias en el músculo longitudinal del plexo mientérico.

La fase muscular
Desde el punto de vista de la patogénesis, los cambios estructurales y metabólicos son relevantes en el ámbito de las fibras musculares, sitio de localización definitiva de las larvas de Trichinella spiralis. Luego de su entrada en la célula muscular comienza el lento y progresivo desarrollo de una entidad altamente especializada la célula nurse.
Este proceso, en el hombre y animales de laboratorio se inicia alrededor del día 15 y se completa entre las 4 y 5 semanas post-infección.
La cápsula que encierra a la larva está compuesta por una porción interna derivada de la misma fibra muscular y una porción externa, hialina y homogénea, derivada del sarcolema.
Generalmente hay una larva dentro del quiste, a lo sumo 2 y muy esporádicamente más de 2.
El proceso de formación de la cápsula que culmina con la formación del quiste sugiere una alteración especifica y adaptación del músculo infectado a la presencia de un nuevo individuo, la larva de T. spiralis. El tamaño de los quistes maduros, varia según el huésped, mientras que el ratón exhibe los más pequeños, 0.1-0.2 mm de largo y 0.02-0.1 mm de ancho y el oso polar los más grandes 0.8 y 0.32 mm. Los quistes del cerdo se encuentran en un tamaño intermedio de 0.2-0.6 mm de largo por 0.2-0.3 mm de ancho. (Campbell, W.C, 1983).
Todas las especies de Trichinella, excepto T. pseudospiralis y T papuae forman células nurse.
Las proteínas de excreción-secreción (ES) del parásito, están involucradas en los mecanismos de de-diferenciacion de la célula muscular y formación de la célula nurse.

Trichinella spiralis Patogénesis de las infecciones animales
Mabel Ribicich Med Vet MS
Parasitologia y Enfermedades Parasitarias FCV UBA


La glicoproteína de 43 kDa secretada por T.spiralis ha sido de particular interés en la formación de la célula nurse ya que se ha propuesto que ésta no se encuentra en las secreciones de T. pseudospiralis. (Vassilatis, 1996).
El proceso siguiente en la musculatura del hospedador será la calcificación, y la misma varia en tiempo en las distintas especies observándose tan temprano como 2 meses para la rata y 24 meses para el ratón, en el hombre se puede iniciar a los 5 meses y la calcificación total, completarse a los 18 meses.
En el caso del cerdo, el proceso comenzaría a los 5 meses completándose a los 9 meses. (Campbell, W.C, 1983)

Otros sistemas involucrados
El intestino y la musculatura son las localizaciones predilectas de este parásito, los cuales le permiten desarrollar su ciclo biológico, pero ¿hay otros órganos involucrados en este proceso?
El estadio adulto de T.spiralis, queda confinado al tubo digestivo, pero las larvas recién nacidas (NBL) tienen la oportunidad de recorrer vía sanguínea diversos órganos entre los cuales se encuentran: pulmones, corazón, hígado, bazo, riñón, SNC, ojos y medula ósea, como más importantes.
Sin embargo, las larvas deben ser capaces de abandonar los mismos y encontrar los músculos esqueléticos para asegurar el éxito de la infección.

Hospedadores y localización
La localización y concentración de L1 varían según la especie afectada, siendo en cerdos experimentalmente infectados el diafragma, lengua, masetero, jamón, bases de lengua, abdominales, intercostales y paletas. (Campbell et al., 1993, Ribicich, 1999, 2001)
En herbívoros experimentalmente infectados las Trichinellas fueron halladas en masetero, lengua y diafragma. (Smith, H.J, et al., 1990) para bovinos, mientras que en cabras las larvas mostraron especial afinidad por la lengua, maseteros, diafragma, músculos extensores y flexores, intercostales y miocardio en orden decreciente. (Reina, D. et al., 1996).


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En cerdos infectados experimentalmente no se encontraron larvas de Trichinella en la musculatura del miocardio, aun en animales con altas cargas parasitarias y con muertes en la etapa aguda de la enfermedad. (Ribicich, 1999, 2000, 2001).
Para zorros el número más alto de larvas por gramo (lpg) fueron halladas en los músculos de las patas, ojos, diafragma y lengua. (Kapel, Chr. M. et al., 1994).
En los equinos las larvas de Trichinella spiralis mostraron predilección por músculos localizados en la cabeza del animal. (Pozio, E, et al, 1998).
En líneas generales para todas las especies, los músculos ubicados anteriormente al costillar del animal aparecen como los más fuertemente infectados por larvas de T.spiralis.

Síntomas y signos
Las formas intestinales pueden producir cierto grado de irritación y provocar enteritis aguda en infestaciones intensas. Los signos clínicos son muy variables y pueden simular otras enfermedades en el caso de los animales. (Soulsby, E.J.L, 1987).
En las personas afectadas de trichinellosis los signos y síntomas de la fase entérica, corresponden a los de una gastroenteritis moderada a severa dependiendo de la cantidad de larvas ingeridas (anorexia, nauseas, vómitos, dolor abdominal, diarrea, fiebre, deshidratación). En la fase parenteral el síndrome trichinelósico esta caracterizado por edema facial, dolores musculares, sudoración, debilidad y frecuentemente fiebre.
En cerdos inoculados experimentalmente con Trichinella spiralis se observó que algunos presentaron tos, decaimiento y mialgias, sin embargo la mayoría de los animales no presentaron signos clínicos. En algunos casos es posible observar el edema periorbitario e inyección conjuntival, a semejanza de las infecciones humanas. Es importante destacar que la signología clínica es de escaso valor para ser utilizada en la práctica, para el diagnóstico diferencial de la enfermedad en los cerdos y otras especies animales. (Ribicich, 1999).
Los perros, gatos, y otros animales de compañía pueden evidenciar los signos clínicos, sospechosos de la enfermedad y en consecuencia es factible realizar un diagnóstico presuntivo de trichinelosis por parte del veterinario.

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Mabel Ribicich Med Vet MS
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En las especies de consumo, la observación de los signos se dificulta por el manejo de las distintas producciones animales, en consecuencia se recurre al diagnostico de la enfermedad en el momento de la faena. (Ver técnica de digestión)


Técnica de digestión artificial para búsqueda de larvas
de Trichinella spiralis en carne porcina (en frigorífico)

1. Pesar 5 g de diafragma de cada cerdo (como mínimo) y procesar en muestras agrupadas de 20 animales (20 cerdos= 100g)
2. Picar la carne en la procesadora
3. Calentar 1.500 ml de líquido de digestión* a 45 ± 2º C y agregar la carne.
4. Colocar la carne y el liquido de digestión en un agitador magnético, con iman a una temperatura de 45 ± 2º C a velocidad moderada, hasta digestión total (45 minutos a una hora).
5. Filtrar el líquido de digestión por colador de 80 meshes y recuperar el filtrado.
6. Dejar sedimentar por 30 minutos.
7. Realizar decantaciones sucesivas hasta obtener un volumen de 10 ml.
8. Clarificar el líquido de digestión.
9. Realizar el conteo en lupa estereoscópica
10. Calcular las larvas por gramo (LPG) del tejido analizado.


* Liquido de digestión:
Pepsina 1:10000= 15 g
HCl= 15 ml
H2O destilada 1500 ml

Al encontrar animal/les positivo/s, se procede al decomiso y se realiza la investigación epidemiológica para identificar el origen del/los animal/les.
Se determina así un foco de triquinosis, el cual es mantenido bajo vigilancia oficial. (SENASA, Manual de procedimientos trichinelosis)
El establecimiento de origen del animal se considera sospechoso y a partir de ese momento se implementan las medidas de control correspondientes y las siguientes medidas cautelares:
1. Identificación de los animales
2. Censado de todas las categorías de porcinos presentes en el establecimiento
3. Los porcinos serán mantenidos en lugares de aislamiento dentro de la misma explotación
4. Se prohíbe la entrada y salida de porcinos del establecimiento, sin autorización oficial
5. Remitir los porcinos a la plantas faenadoras habilitadas por el Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria

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Mabel Ribicich Med Vet MSc
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Bibliografía

1. Campbell, W.C. (1983) Trichinella and Trichinosis . Plenum Press. New York and London.
2. Despommier, D.D; Sukhdeo, M; Meerovitch, E. (1978). Trichinella spiralis: site selection by the larva during the enteral phase of the infection in mice. Exp. Parasitology. 44: 209-215.
3. Despommier, D.D. (1998) How does Trichinella spiralis:make itself at home? Parasitology Today Vol 14. N.8. 44: 209
4. Kapel, Chr. M, Sv. Aa. Henriksen, H.H. Dietz, P. Henriksen and P. Nansen. (1994). A study on the Predilection Sites of Trichinella spiralis Muscle Larvae in Experimentally Infected Foxes (Alopex lagopus, Vulpes vulpes) Acta vet. Scand. Vol. 35 n.2.
5. Pozio, E. G.V. Celano, L Sacchi, C. Pavia, P. Rossi, A. Tamburrini, S. Corona, G La Rosa. (1998) Distribution of Trichinella spiralis larvae in muscles from a naturally infected horse. Veterinary Parasitology. 74.19-27.
6. Reina,D., M.C. Munoz-Ojeda, F. Serrano, J.M. Molina, Y Navarrete. (1996). Experimental trichinellosis in goats. Veterinary Parasitology. 62 125-132.
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Estudio de las alteraciones histopatológicas en cerdos infectados experimentalmente
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12. SENASA. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria.
Manual de procedimientos Trichinellosis
13. Vassilatis, Demetrios K., Dickson D. Despommier, Ramona I. Polvere, Allen M. Gold, Lex H.T. Van der Ploeg (1996) Trichinella pseudospiralis secretes a protein related to the Trichinella spiralis 43-kDa glycoprotein. Molecular and Biochemical Parasitology 78 25-31.



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